尊龙凯时的Matrigel基质在使用过程中可能会出现色差变化,从淡黄色到深红色,这是由于酚红和碳酸氢盐与CO2的作用所致。与5% CO2平衡后,这种色差会显著减少。在冻融后,请轻轻摇晃试剂瓶,以确保Matrigel均匀分散。所有操作应在无菌环境下进行,试剂瓶的瓶盖可以使用70%乙醇擦拭并自然干燥。同时,请使用预冷的移液器,以确保Matrigel呈现均匀的浆状。
Matrigel基质层的厚度可调,细胞可以在0.5 mm的Matrigel表面上生长,或在1 mm厚的Matrigel三维基质内生长。然而,过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层,虽然可以用于细胞贴壁,但不适用于细胞分化研究。提醒注意:可将冻融后的Matrigel分装于多个小管中,所有分装均需使用预冷的冻存管,迅速冷冻保存,避免反复冻融。
在22-35°C的温度环境下,Matrigel会迅速成胶,因此在解冻时建议在4°C冰上放置一夜。所有相关用品在使用前应置于冰浴中,并务必使用预冷的移液管、吸头及小管进行操作。成胶后的Matrigel在4-24小时后可以重新液化,保持使用灵活性。
推荐包被与成胶方法
为了确保尊龙凯时提供的Matrigel基质膜的成胶性能与稳定性,稀释浓度不应低于1:3,可用无血清培养基进行稀释,Matrigel成胶后应立即使用。
薄胶成胶方法
- 冻融后,使用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质,确保其均匀浆化。
- 将所需使用的培养板置于冰上,加入浓度为50 μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
- 在37°C下放置30分钟,即可使用。
厚胶成胶方法
- 冻融后,使用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质,确保其均匀浆化。
- 将所需使用的培养板置于冰浴,将培养的细胞与Matrigel基质混合,使其悬浮于基质中,加入浓度为150-200 μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
- 在37°C下放置30分钟,即可形成胶体。
此方法可以同时支持细胞培养基质的加入,也可以让细胞直接在胶表面生长。
薄层包被方法
- 冻融后,使用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成浆。
- 根据需要,采用无血清培养基稀释Matrigel基质,确保根据实验要求确定最佳包被浓度。
- 将稀释的Matrigel基质均匀包被于所需的培养器皿中,包被量应至少覆盖整个生长表面,室温下孵育1小时。
通过以上步骤,您可以充分利用尊龙凯时的Matrigel基质,为生物医疗领域的研究提供坚实的基础。确保遵循操作规范,以获得最佳的实验效果。