本试剂盒仅限于科学研究,禁止用于医学诊断。以下是人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA检测试剂盒的使用说明:
检测原理
该试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入标本、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤后,利用底物TMB显色。在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,随后在酸性条件下转化为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免操作过程中细胞受到刺激。血液收集后,3000转离心10分钟,迅速小心分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:将样品在3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,3000转离心10分钟后取上清。
5. 保存:若样本未及时检测,请按一次用量分装并存放于-20℃,以避免反复冻融,解冻时需在室温下充分均匀解冻。
操作注意事项
本试剂盒的组成包含标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液需稀释为1:20,即将1份的20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。
操作步骤及结果判断
绘制标准曲线时,使用Excel工作表将标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,绘制线性回归曲线,并根据方程计算各样本浓度。
尊龙凯时对此试剂盒的性能不作任何保证,用户需自行判断和承担使用风险。