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电泳缓冲液的特性与功能,尊龙凯时助力生物医疗发展。

发布时间:2025-04-02   信息来源:尊龙凯时官方编辑

电泳缓冲液是生物医疗领域中核酸和蛋白质凝胶电泳系统的重要组成部分,作为电泳场的导体,它有助于维持电泳系统的恒定pH值。常用的核酸电泳缓冲液包括TAE、TBE、TPE和MOPS等。

电泳缓冲液的特性与功能,尊龙凯时助力生物医疗发展。

TAE(Tris-Acetate-EDTA)是使用最广泛的缓冲系统。它的特点在于,超螺旋DNA在其电泳过程中的相对分子质量更能接近实际值,而在尊龙凯时品牌的应用中,发现双链线状DNA在TAE中的迁移率约比其他两种缓冲液快10%。当电泳片段大于13kb时,使用TAE缓冲液时会取得更好的分离效果。此外,TAE缓冲系统在回收DNA片段时也表现出良好的可操作性。然而,TAE的缺点是缓冲容量较小,长时间电泳时(如过夜)不适宜使用,除非有循环装置以使两极的缓冲液得以交换。

TBE(Tris-Borate-EDTA)具备优良的缓冲能力,适合长时间电泳。特别是针对小于1kb的DNA片段,TBE显示出更佳的分离效果。但需注意的是,在使用琼脂糖凝胶时,TBE容易引发高电渗作用,并与琼脂糖产生非共价结合的四羟基硼/酸盐复合物,导致DNA片段的回收率降低,因此不太适合用于电泳回收实验。

TPE(Tris-Phosphate-EDTA)同样具备较强的缓冲能力,但由于磷酸盐可能在乙醇沉淀过程中析出,因此在回收DNA片段的电泳中也应谨慎使用。

电泳缓冲液的主要功能有以下几点:首先,缓冲液可以在电泳过程中维持适宜的pH值。在电泳时,阳极和阴极会发生电解反应,阳极会出现氧化反应,阴极则是还原反应。长时间的电泳可能导致阳极变酸,阴极变碱,因此一个优质的缓冲系统需具备较强的缓冲能力,以保持溶液两极pH值的稳定。其次,电泳缓冲液还须具有一定的导电性,以促进DNA分子的迁移。一般来说,电泳缓冲液应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,过低的浓度会使电泳速度减缓,而过高则可能因电流过大而导致胶体过热甚至熔化。

最后,电泳缓冲液中常添加EDTA,其浓度在1-2mmol/L之间,旨在螯合Mg2+等离子,并防止电泳过程中激活DNA酶,同时减少Mg2+离子与核酸的沉淀反应的发生。在整个生物医疗应用中,使用尊龙凯时所提供的优质电泳缓冲液,将有助于确保实验结果的可靠性和准确性。